zKirus病(bing)毒规模化(hua)生产转染试剂(ji)
2019-03-01
zKirus简介 zKirus为(wei)本(ben)公司研发的(de)病毒(du)(du)规模(mo)化生(sheng)产专用转染试剂,以特异(yi)的(de)高纯度阳离(li)子聚合物为(wei)主(zhu)要配方,可(ke)用于(yu)慢病毒(du)(du)、反转录病毒(du)(du)及反向(xiang)遗传学过程的(de)转染,产生(sheng)高滴度病毒(du)(du)。本(ben)包装zKirus体积为(wei)400µl,正常可(ke)用于(yu)40个100mm培养皿(min)的(de)病毒(du)(du)包装操(cao)作(反向(xiang)遗传学操(cao)作推(tui)荐用60mm培养皿(min))。
详细介(jie)绍:
操作方法 (以100mm培养皿为例,其他请按照培养面积等比例调整):
1、 包(bao)装细(xi)胞(一(yi)般为293T或其衍生细(xi)胞株)转染前30min-2h换(huan)含(han)血(xue)清(qing)的完(wan)全(quan)培养基(ji)7ml;
2、 取10µl zKirus与0.5ml含双抗培养(yang)基(ji)轻柔混匀;
3、 取(qu)30µg病毒载(zai)体/包(bao)装质粒与0.5ml含双抗(kang)培养基轻柔混匀;
4、 室温静置5min;
5、 将2中zKirus溶(rong)液加入3中,轻柔吸打(da)混匀;
6、 室温静(jing)置15-30min;
7、 将(jiang)1ml转染混合液轻柔加入包(bao)装细胞中,轻柔混匀;
8、 转染(ran)48-72h收集细胞上清,离心弃沉淀,0.45µm滤器(qi)过滤,得到病毒悬液。