详细介(jie)绍:


操作方法 (以100mm培养皿为例,其他请按照培养面积等比例调整):

1、          包(bao)装细(xi)胞(一(yi)般为293T或其衍生细(xi)胞株)转染前30min-2h换(huan)含(han)血(xue)清(qing)的完(wan)全(quan)培养基(ji)7ml;

2、         ; 取10µl zKirus与0.5ml含双抗培养(yang)基(ji)轻柔混匀;

3、  ;        取(qu)30µg病毒载(zai)体/包(bao)装质粒与0.5ml含双抗(kang)培养基轻柔混匀;

 4、          室温静置5min;

5、    ;      将2中zKirus溶(rong)液加入3中,轻柔吸打(da)混匀;

6、          室温静(jing)置15-30min;

7、          将(jiang)1ml转染混合液轻柔加入包(bao)装细胞中,轻柔混匀;

8、          转染(ran)48-72h收集细胞上清,离心弃沉淀,0.45µm滤器(qi)过滤,得到病毒悬液。


附件1:zKirus病毒规模化生产转染试剂